PCR MASTER MIX
BESTELL-INFORMATION
Best.-Nr. |
Anzahl der 50 µl Reaktionen |
Volumen |
Preis (EUR) |
|
2x PCR Master Mix |
# R 500 |
100 | 2 x 1.25 ml | 39,00 |
# R 501 |
500 |
10 x 1.25 ml | 167,00 |
|
2x Red PCR Master Mix |
# R 540 |
100 |
2 x 1.25 ml | 48,75 |
# R 541 |
500 |
10 x 1.25 ml | 195,00 | |
2x Hot Start PCR Master Mix |
# R 530 | 100 |
2 x 1.25 ml | 56,0 |
# R 531 | 500 |
10 x 1.25 ml | 234,00 |
|
2x Red Hot Start PCR Master Mix |
# R 520 | 100 |
2 x 1.25 ml | 67,00 |
# R 521 | 500 |
10 x 1.25 ml | 280,00 |
BESCHREIBUNG
Der 2x PCR Master Mix beinhaltet alle benötigten
Reagenzien für eine PCR, so dass die PCR leicht und einfach
durchzuführen ist. Die Konzentrationen aller Bestandteile (einschließlich der
Taq Polymerase bzw. der Hot Start Taq Polymerase) sind optimal für eine
erfolgreiche PCR aufeinander abgestimmt. Mit dem 2x PCR Master Mix müssen Sie
nur noch die entsprechenden Primer und die Template DNA zufügen, wodurch der
Pipettieraufwand und auch der Eintrag möglicher Fehlerquellen minimiert wird.
Der Mix ist konzipiert für die Amplifikation von DNA-Fragmenten bis zu 4 kb,
aber auch längere Targets können in den meisten Fällen erfolgreich amplifiziert
werden.
Der Red PCR Master Mix und der Red Hot Start PCR Master Mix enthalten einen inerten roten Marker-Farbstoff, so dass eine Identifikation der Reaktionen, zu denen das Enzym zugegeben wurde, möglich ist. Der Farbstoff hat keine nachteiligen Auswirkungen auf die PCR.
QUALITÄTSKONTROLLE
FUNKTIONELLE TESTS |
SPEZIFIKATION |
4 kb PCR |
Amplifikation erfolgreich |
PHYSIKALISCHE TESTS |
SPEZIFIKATION |
Endonuklease Assay |
Keine Aktivität nachweisbar |
DNase Assay |
Keine Aktivität nachweisbar |
RNase Assay |
Keine Aktivität nachweisbar |
BASIS PROTOKOLL
Pipettieren Sie die folgenden Komponenten in ein PCR-Reaktionsgefäß und geben Sie die entsprechende Menge Wasser hinzu, um ein Endvolumen von 50 µl zu erreichen:
Komponente |
Volumen (in µL) |
Finale Konzentration |
2 x PCR-Master Mix |
25 |
1x (1.5 mM MgCl2) |
Vorwärts-Primer |
variabel |
0.2 – 1 µM |
Rückwärts-Primer |
variabel |
0.2 – 1 µM |
Template-DNA |
variabel |
1 – 150 ng |
Destilliertes, steriles
Wasser |
Zugabe auf Endvolumen von 50 |
|
Endvolumen |
50 |
|
Mischen Sie alle Komponenten vor der Verwendung vorsichtig, um Konzentrationsgradienten im Röhrchen zu
vermeiden und setzen Sie den Mix auf Eis in geeigneten PCR-Röhrchen an. Kein Vortexen oder Zentrifugieren. Die
optimalen Konzentrationen der Primer, der Templates sowie das Temperaturprofil
im Cycler müssen für jede Reaktion individuell angepasst werden.
Um optimale Ergebnisse zu erhalten pipettieren Sie zuerst die Primer, dann die Template-DNA und zuletzt den Master Mix.
TROUBLESHOOTING
Beobachtung |
Check |
Unspezifische Produkte (smearing) |
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Geringe Produktausbeute |
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Kein Produkt |
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LAGERUNG
Lagerung bei -20°C für 12
Monate. Minimieren
Sie Einfrier- und Auftauzyklen durch das Aliquotieren des Master Mixes.
WARNUNG
Nur für Forschungszwecke. Nicht geeignet
für die Diagnostik von Krankheiten bei Menschen oder Tieren. Keine interne oder
externe Anwendung am Mensch oder Tier.